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Diseño sin título – 1

Calibraciones de lectores de microplacas

Calibración in situ o en laboratorio, con un servicio personalizado y flexible. Tiempo de entrega 5 días.

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¿Qué calibramos?

Calibramos lectores de microplacas y espectrofotómetros ELISA.

  • Determinación de la exactitud de la longitud de onda hasta 5 puntos de 250nm a 650nm (si el equipo lo permite).
  • Determinación de la exactitud de la escala fotométrica (absorbancia) en el rango del equipo: máximo 4 puntos en el rango del equipo de 400 a 900nm. En caso de no indicarse los puntos el equipo el laboratorio calibrará en: 405nm, 450nm, 490nm, y 650 nm, o en aquellos 4 puntos que permita el equipo. (Para puntos adicionales de calibración, consultar)
  • Determinación de la repetibilidad de las lecturas de absorbancia.

Lectores de microplacas

Un lector de microplacas es un equipo óptico que permite detectar procesos o fenómenos biológicos, químicos o físicos, a través de la medida de la absorbancia. Se conocen por el nombre de lectores o espectrofotómetros ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay-Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas), asociado a una técnica de laboratorio para la determinación de antígenos en muestras.

El principio físico del equipo es idéntico al de un espectrofotómetro uv-visible: cantidad de luz que transmite o absorbe una muestra para diferentes longitudes de onda. Para ello se compone de fuente de iluminación, monocromador y detector.

Componentes

Sistema de iluminación

En los lectores de microplacas lo más frecuente es disponer de una fuente de tungsteno para la zona del visible, aunque también hay en el mercado equipos que llegan al rango ultravioleta. A diferencia de un espectrofotómetro uv-visible convencional, el lector de microplacas suele trabajar de los 400nm a 700nm.

Detector

El detector se encarga de transformar la señal que recibe (fotones) y convertirla a señal eléctrica, de forma que en función de la intensidad de esta se pueda registra por un sistema que proporciona los valores números de absorbancia o DO.

La calibración de la escala del detector consiste en determinar la corrección de los valores de absorbancia para las longitudes de onda determinadas y su incertidumbre.

Monocromador

El monocromador permite separar el espectro de iluminación, proporcionando un haz de energía a una longitud de onda concreta. De esta forma se consigue trabajar a una longitud de onda determinada. Por ejemplo, si se trabaja con diferentes compuesto químicos que presentan una absorbancia característica a 690nm, interesa que el monocromador separe de forma precisa esta longitud de onda del resto. Habría que asegurarse de que el equipo trabaja a 690nm y no a 693nm.

Si la longitud de onda es crítica o afecta a las medidas que se realizan es necesario realizar la calibración de esta parte del equipo, conocido como calibración en longitud de onda.

La calibración en longitud de onda comprueba la diferencia entre la longitud de onda que mide el equipo y la longitud de onda del patrón de referencia empleado. Se puede calibrar diferentes puntos de longitud de onda en todo el rango del equipo.

ELISA

Alcance técnico para la calibración de lectores de microplacas

En Eyco disponemos de competencia técnica y patrones reconocidos por ENAC, con trazabilidad metrológica garantizada para la calibración de la escala de longitud de onda y la escala del detector en absorbancia.

Campo de medida
Range
Incertidumbre (*)
Uncertainty (*)
Norma/Procedimiento
Uncertainty (*)
Instrumentos a calibrar
Instruments
Código
Code
TRANSMITANCIADENSIDAD ÓPTICA DE TRANSMITANCIA (ABSORBANCIA)
OPTICAL TRANSMITTANCE DENSITY (ABSORBANCE)
400 nm < λ ≤ 780 nm
0,0 ≤ A < 1,0
1,0 ≤ A < 1,5
1,5 ≤ A < 2,0
2,0 ≤ A < 2,5
0,0065
0,025
0,055
0,065
PT39
Procedimiento
interno basado en:
Real Farmacopea
Española
IUPAC Recommended
Reference Materials
for realization of
Physicochemical
properties
Espectrofotómetros ELISA
Lectores de Microplacas
A, I
LONGITUD DE ONDA
WAVELENGTH
200 nm ≤ ʎ ≤ 650nm0,30 nmPT39
Procedimiento
interno basado en:
Real Farmacopea
Española
IUPAC Recommended
Reference Materials
for realization of
Physicochemical
properties
Espectrofotómetros ELISA
Lectores de Microplacas
A,I

El resultado

Tras la calibración del equipo recibirá el Certificado de Calibración trazable a laboratorios reconocidos por ENAC. En este Certificado se recoge la identificación completa de su equipo, el procedimiento seguido para la calibración y el resultado

El resultado de la calibración es una corrección junto con su incertidumbre. La corrección es la diferencia entre el valor del patrón de referencia y el valor medido por su equipo. Obtendrá la corrección de la longitud de onda y la absorbancia. Así como si el cliente lo necesita los valores de luz difusa y linealidad.

A partir de los valores de corrección y su incertidumbre podrá establecer los valores de aceptación y rechazo del equipo.

También junto a su equipo recibirá una etiqueta de calibración con el número de certificado, identificación del equipo y fecha de calibración.

Preguntas frecuentes